Local : 3132, pav. J.-Armand-Bombardier
Support technique : Emmanuel Bajon et Nicolas Stifani
Mode d’emploi
- Microscope à épifluorescence plein champs, inversé
- Fond clair, DIC, contraste de phase et polarisation
- Imagerie 4D (XYZT)
- Caméra CCD 14 bit
- Mise au point automatique par algorithme
- Moteur Z, platine manuelle
- Température (20-50°C) via une platine chauffante
- Micromanipulation et femto-injection possibles
Applications
- Microscopie de cellules de mammifères, levures et bactéries
- Épifluorescence à champ large (lampe au mercure)
- Fond clair, DIC, contraste de phase et polarisation
- Imagerie multidimensionnelle (automatique : Z, durée)
- Imagerie avec température possible seulement avec les objectifs à longue distance de travail (4x, 20x et 40x ELWD)
Objectifs
- 4x/0,10 Plan
- 20x/0,40 Ph1 ADL LWD, couvre-objet 1,2 mm; WD 3,0
- 40x/0,60 Plan Fluor, Ph2, DIC M, ELWD avec une bague correctrice 0,0-2,0 mm; WD 2,7-3,7
- 40x/0,75 Plan Fluor; Ph2 DLL, 0,17 mm; WD 0,72
- 60x/1,40 Plan Apo, DIC H; 0,17 mm; WD 0,21 immersion à l’huile
- 100x/1,40 Plan Apo, DIC H; 0,17 mm; WD 0,13; immersion à l’huile
Sources lumineuses
- Lampe au mercure (HBO 103W/2 d’Osram) pour l’épifluorescence
- Lampe halogène pour la lumière transmise
Détecteurs
- Caméra CCD 14 bit, CoolSnap HQ2 de Photometrics : 1392×1040 pixels de 6,45 µm chacun, 11 fps
- Refroidie à -30oC, bruit d’intégration (Readout noise) de 4,5 e- @ 10 MHz et 5,5 e- @ 20 MHz
- Possibilité d’ajouter une caméra sur la sortie frontale
Filtres
- Cubes de filtres (à changement manuel (non motorisé), tourelle à 6 positions) :
- DAPI (Chroma 31000): BP AT350/50x BS 400dclp BP ET460/50m
- CFP (Chroma 31044v2): BP D436/20x BS 455dclp BP D480/40m
- GFP (Chroma 41001): BP ET480/40x BS 505dclp BP ET535/50m
- EYFP (Chroma 41028): BP HQ500/20x BS Q515lp BP HQ535/30m
- Cy3 (Chroma 41007): BP HQ535/50x BS Q565lp BP HQ610/75m
- mCherry (Chroma 49008 ET): BP ET560/40x BS T585lpxr BP ET630/75m
- Texas red (Chroma 41004): BP ET560/40x BS Q595lp BP HQ645/75m
- Cy5 (Chroma 31023): BP D640/20x BS 660dclp BP D680/30m
- 5 (Chroma 41022): BP HQ665/45x BS Q695lp BP HQ725/50m
Platine et moteur Z
- Déplacements en XY : platine manuelle
- Déplacements en Z : Moteur Z (Prior)
Incubation, perfusion, micromanipulation et injection
- L’autre alternative est l’utilisation de la Thermo Plate qui agit comme une platine transparente et chauffante (20-50°C).
- La micromanipulation à une pipette est possible en installant l’Injectman 5179 de Brinkmann/Eppendorf
- La femto-injection est possible en installant le Femtojet 5247 de Brinkmann/Eppendorf
Contenants et porte-échantillon compatibles avec la platine (ouverture ronde)
- Pétri et flacons de culture de toutes grandeurs
- Lame histologique
- Plaque multi-puits
- Chambre de perfusion FCS2 de Bioptechs
Logiciel
- Metamorph de Molecular Devices
Accessoires
- Micro-manipulateur : Injectman 5179 de Brinkmann (Eppendorf)
- Femtoinjecteur : Femtojet 5247 de Brinkmann (Eppendorf)
- Thermo Plate MATS-U505R30 de Tokai Hit
- Platine chauffante et transparente compatible avec microscopie : ambiante à 50°C +/-0,3°C
- Épaisseur de la plaque de verre : 0,5 mm au centre (50 mm x 50 mm), 1,0 mm ailleurs
- Compatible avec le contraste de phase, le DIC et la polarisation
- Chambre environnementale FCS2 de Bioptechs (FCS2 : Focht Live-Cell Chamber System)
- Chambre de perfusion fermée compatible avec le DIC, la fluorescence et les objectifs à immersion
- Micro-perfusion par un système de Microaqueduct: 0,2 – 180 ml/h
- Échange complet du milieu possible par la pompe péristaltique en 1 sec. (max.)
- Contrôle de la température de la chambre : ambiante – 50°C +/-0,1°C
- Volume de la chambre : 6,6 – 706 µl selon l’épaisseur du joint de montage (50 – 1000 µm)
- Champ visuel : 22 mm de diamètre
- Nécessite culture sur lamelle de 40 mm de diamètre et 0,17 mm d’épaisseur
- Chauffe-objectif compatible avec les objectifs de 26 à 35 mm de diamètre (100x à immersion)
- Incubateur Boekel: mini-étuve portative pour garder le milieu de perfusion à la bonne température
Support technique
- André Lévesque, responsable des plateformes de microscopie et d’histologie du CIB
- Nicolas Stifani, coordonnateur principal microscopie, Faculté de médecine, local 3024, pav. J.-Armand-Bombardier
Dernière mise à jour : 21 juin 2023