Local : D-509
Support technique : Monique Vasseur et Nicolas Stifani
Mode d’emploi
- Microscope à épifluorescence plein champ, inversé
- Fond clair et contraste de phase
- Moteur Z et platine motorisée
- Roues de filtres (excitation et émission)
- Mise au point automatique (PFS et algorithme de NIS)
- Incubateur (32-42°C) opaque à la lumière
- Chambre LiveCell avec CO2
- Micromanipulation et femto-injection possibles
- Imagerie 6D (XYZTC et multipoint)
- Caméras CCD, 14 et 16 bit
Applications
- Microscopie de cellules vivantes (Live cell) avec température et CO2 à haute résolution (10x à 100x)
- Imagerie multidimensionnelle 6D de longue durée
- Épifluorescence plein champ (lampe métal-halide)
- Luminescence (capture directe sous le microscope), BRET
- Fond clair et contraste de phase (pas de DIC)
Objectifs
- 10x/0,30 Plan Fluor, Ph1 DL; 1,20 mm; WD 15,20 mm
- 20x/0,45 Plan Fluor, Ph1 ADL ELWD avec bague correctrice 2-2,0 mm; WD 7,40 mm
- 40x/0,60 Plan Fluor, Ph2 ADL ELWD avec une bague correctrice 0-2,0 mm; WD 3,7-2,7 mm
- 40x/0,90 S Fluor; DIC M/N2 avec une bague correctrice 0,11-0,23 mm; WD 0,30 mm
- 40x/0,95 Plan Apo; DIC M/N2 avec une bague correctrice 0,11-0,23 mm; WD 0,14 mm
- 60x/0,70 Plan Fluor, DIC M/N2 ELWD avec bague correctrice 050-1,50 mm; WD 2,1-1,5 mm
- 60x/1,40 Plan Apo, Ph3 DM, 0,17 mm; WD 0,21 mm; immersion à l’huile; compatible avec Perfect Focus et l’épifluorescence
- 60x/1,40 Plan Apo, VC DIC N2, 0,17 mm; WD 0,13 mm; immersion à l’huile
- 100x/1,45 Plan Apo lambda OFN25 DIC N2; 0,17 mm; WD 0,13 mm; immersion à l’huile
Sources lumineuses
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- X-Cite 120 (lampe métal-halide de 120 watts) pour l’épifluorescence
- Délai de réchauffement optimal pour quantification : 30 min.
- Stabilité de l’intensité sur longue durée (s-h) : +/- 1,5%
- Stabilité de l’intensité courte durée (ms) : pulsation à chaque 3 ms
- Réglage de l’intensité de la lampe par 5 filtres de densité neutre
- Lampe halogène pour la lumière transmise
- X-Cite 120 (lampe métal-halide de 120 watts) pour l’épifluorescence
Détecteurs
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- Caméra CCD 14 bit, CoolSnap HQ2 de Photometrics : 1392×1040 pixels de 6,45 µm chacun, 11 fps
- Refroidie à -30°C, bruit d’intégration (Readout noise) de 4,5 e- @ 10 MHz et 5,5 e- @ 20 MHz
- Caméra CCD 14 bit, CoolSnap HQ2 de Photometrics : 1392×1040 pixels de 6,45 µm chacun, 11 fps
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Sur demande (non installées) :
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- Possibilité d’ajouter une caméra sur la sortie frontale et une autre sur la sortie sous le microscope
- Caméra CCD 16 bit, faible bruit, Pixis 1024B de Princeton : 1024×1024 pixels de 13 µm chacun; 0,1 fps
- Temps d’exposition minimum : 600 ms
- Temps d’intégration minimum : 10 secondes ( ~ délai avant de voir une image à l’écran)
- Refroidie à -70°C, bruit d’intégration (Readout noise) de 3,6 e- @ 0,10 MHz et 9 e- @ 2 MHz
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Filtres
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- Cubes de filtres (tourelle motorisée à 6 positions) :
- DAPI (Chroma 31000v2): BP AT350/50x BS DCLP400 BP D460/50m
- CFP (Chroma 49001 ET): BP ET436/20x BS TLP455 BP ET480/40m
- GFP (Chroma 41001 HQ): BP HQ480/40x BS QLP505 BP HQ535/50m
- YFP (Chroma 49003 ET): BP ET500/20x BS TLP515 BP ET535/30m
- Cy3.0 (Chroma SP102v1): BP HQ546/11x BS QLP557 BP HQ567/15m
- Cy3.5 (Chroma SP103v2): BP HQ581/10x BS QLP593 BP HQ617/40m
- mCherry (Chroma 49008 ET): BP ET560/40x BS TLPxr585 BP ET630/75m
- Cy5.0 (Chroma 49006 ET): BP ET620/60x BS TLPxr660 BP ET700/75m
- Cy5.5 (Chroma 41022): BP HQ665/45x BS QLP695 BP HQ725/50m
- Cubes de filtres (tourelle motorisée à 6 positions) :
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- Cubes de miroirs polychroïques (à utiliser avec les roues de filtres):
- DAPI/FITC/TRITC : Réflexion : SP 410 + BP 433/10 + BP 484/32 + BP 557/30
Transmission : BP 419/18 + BP 453/30 + BP 521/42 + BP 611/78 - CFP/YFP/CY5: : Réflexion : BP 433/33 + BP 506/32 + BP 620/53
Transmission : BP 469/42 + BP 558/72 + LP 647 - CFP/YFP/mCherry: : Réflexion : SP 453 + BP 500/33 + BP 576/37 + LP 668
Transmission : BP 469/31 + BP 538/41 + BP 633/73
- DAPI/FITC/TRITC : Réflexion : SP 410 + BP 433/10 + BP 484/32 + BP 557/30
- Cubes de miroirs polychroïques (à utiliser avec les roues de filtres):
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- Roue de filtres à l’excitation (8 positions de 32 mm) :
- DAPI (Chroma 86013v2) : BP D350/50
- CFP (Chroma 86008v2) : BP S430/25
- FITC (Chroma 86013v2): BP S484/15
- YFP (Semrock FF01-500/24-32): BP 500/24
- TRITC (Chroma 86013v2): BP S555/25
- mCherry (Chroma ET 236404): BP ET572/35
- CY5 (Chroma 86008v2): BP S622/36
- Roue de filtres à l’excitation (8 positions de 32 mm) :
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- Roue de filtres à l’émission (10 positions de 25 mm) :
- DAPI (Chroma 86013v2) : BP S457/17
- CFP (Chroma 86008v2) : BP S465/30
- FITC (Chroma 86013v2): BP S517/30
- YFP (Chroma 86008v2): BPS550/50
- YFP (Semrock FF01-550/49-25) : BP 550/49
- TRITC (Chroma 86013v2): BP S605/40
- mCherry (Semrock FF01-641/75-25): BP 641/75
- CY5 (Chroma 86008v2): BP S700/75
- Roue de filtres à l’émission (10 positions de 25 mm) :
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NB :
Le système de mise au point automatique PFS de Nikon utilise un LED de 780 +/- 5 nm et un filtre amovible 750 LP.
Cet autofocus coupe les longueurs d’onde > 750 nm et donc ne peut pas être utilisé avec le Cy5.5
Platine et moteur Z
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- Déplacements en XY : platine motorisée
- Déplacements en Z : Moteur Z
- Perfect Focus avec LED de 780 nm et avec filtre dans le trajet lumineux LP 750 nm (inadéquat pour le Cy5.5)
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NB : En lumière transmise, pour que le PFS fonctionne, il faut insérer 2 filtres IR dans le trajet lumineux: celui du PFS et celui du statif près de la lampe halogène.
Incubation
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- Cabinet-incubateur noir opaque, englobant tout le microscope – pour la luminescence
- Contrôleur de température Solent Scientific de 32,0°C à 42,0°C
- Mini-chambre environnementale pour un Pétri de 35 mm seulement
- Contrôleur de CO2 Solent Scientific pour la mini-chambre
- Compatible avec la microscopie en lumière transmise et en épifluorescence
- Cabinet-incubateur noir opaque, englobant tout le microscope – pour la luminescence
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Contenants et porte-échantillons compatibles avec la platine (différents encarts)
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- Plaque multi-puits
- Pétri de 35 mm de diamètre
- Lame et lamelle
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Logiciel
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- NIS Elements de Nikon
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Accessoires
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- Micro-manipulateur avec double pipette de Nikon
- Femtoinjecteur Hamilton ML560
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Support technique
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- Monique Vasseur, responsable de la plateforme de microscopie photonique
- Nicolas Stifani, Coordonnateur Microscopie avancée
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Dernière mise à jour : 18 septembre 2018