Microscope Zeiss Axio-Imager Z2

Zeiss _Z2_

Local : B-301-1
Support technique : Monique Vasseur et Nicolas Stifani
Mode d’emploi

  • Microscope à épifluorescence, droit, plein champ
  • Entièrement motorisé (sauf déviateur pour caméras)
  • Fond clair, DIC et polarisation
  • Imagerie 6D (XYZTC et multipoint)
  • Module Tiles (reconstruction mosaïque)
  • Caméra CCD 12 bit et sCMOS 16 bit
  • Mise au point automatique par algorithme
Applications
  • Microscopie automatisée pour coupes histologiques et pour cellules fixées (cellules de mammifères, levures et bactéries)
  • Épifluorescence plein champ, FISH
  • Imagerie multidimensionnelle 6D (XYZTC et multi-positions) et reconstruction en mosaïque de plusieurs-champs (Tiles)
  • Fond clair, DIC et polarisation

Objectifs
  • 10x/0,30 EC Plan-Neo Fluar, DIC I, Pol, épaisseur du couvre-objet 0,17 mm; WD 5,30
  • 20x/0,80 Plan Apochromat, DIC II, Pol, 0,17 mm; WD 0,61
  • 40x/0,75 EC Plan Neo-Fluar, DIC II, Pol, 0,17 mm; WD 0,71 (manque prisme pour le DIC)
  • 63x/1,40 Plan Apochromat, HR-DIC III, HC-DIC II, Pol, TIRF, 0,17 mm; WD 0,19 immersion à l’huile
  • 100x/1,30 EC Plan Neo-Fluar, HR-DIC III, HC-DIC II, Pol, 0,17 mm; WD 0,20 immersion à l’huile
  • 100x/1,40 Plan Apochromat, HR-DIC III, HC-DIC II, Pol….0,17 mm; WD 0,17 immersion à l’huile

Tableau des objectifs


Sources lumineuses
  • X-Cite exacte de Lumen Dynamics (lampe métal-halide de 200 W) pour l’épifluorescence entre 340-675 nm
    • Filtre ne laissant passer que les longueurs d’onde entre 340 et 675 nm (non-idéal pour Cy 5.5)
    • Délai d’allumage de 4 minutes; réchauffement optimal pour quantification : 30 min.
    • Obturateur interne 5-6 ms
    • Réglage de l’intensité de la lampe par incréments de 1%
    • Possibilité d’étalonner l’intensité de la lampe : de puissance relative (en %) à absolue (en watts)
    • Stabilité de l’intensité sur courte (ms) et longue durée (s – h) : +/-0,5%
  • Lampe halogène 12V/100W pour la lumière transmise

Détecteurs
  • Caméra CCD 12 bit, AxioCam MRm3 de Zeiss : 1388×1040 pixels de 6,45 µm chacun, 14 fps
    • Bruit de lecture (Readout noise) de 7,7 e- @ 25 MHz
  • Caméra sCMOS 16 bit, Prime de Photometrics : 2048×2048 pixels de 6,5 µm chacun, QE 72%
    • Refroidie à -10oC, bruit de lecture (Readout noise) de 0,06 e- /pixel/s
    • 100 fps (full chip) à 833 fps (256×256)
  • Caméra EMCCD 14 bit (16 bit @ 1 MHz), iXonEM+ DU897BV d’Andor : 512×512 pixels de 16 µm chacun
    • Refroidie à -85°C, bruit de lecture (Readout noise) de 1 à 49 e- @ 10 MHz
    • 35 fps (full chip) à 549 fps

NB : Utilisez un temps d’exposition minimum de 10 ms pour éviter le fin clignotement (aux 3 ms) de la X-Cite 120


Filtres
  • Cubes de filtres (tourelle motorisée à 10 positions) :
    • DAPI (Zeiss Set 49): BP 359/48x FT 395 BP 445/50m
    • GFP HE (Zeiss Set 38): BP 470/40x FT 495 BP 525/50m
    • YFP HE (Zeiss Set 46): BP 505/30x FT 515 BP 535/30m
    • Ds red HE (Zeiss Set 43): BP 550/25x FT 570 BP 605/70m
    • Texas red (Zeiss Set 45): BP 560/40x FT 585 BP 630/75m
    • Cy3.0 (Chroma SP102v1) : BP HQ546/11 BS QLP557 BP HQ567/15
    • Cy3.5 (Chroma SP103v1) : BP HQ581/10 BS QLP593 BP HQ617/40
    • Cy5 (Chroma 49009): BP ET640/30x BS TLPXR660 BP ET690/50m
    • Analyseur pour le DIC
    • Position vide pour le fond clair

Platine et moteur Z
  • Platine (XYZ) motorisée : pas de 10 nm +/- 10 (10 nm step)

Incubation
  • Aucune-incubation possible

Contenants et porte-échantillon compatibles avec la platine
  • Lame et lamelle (lame histologique)
Logiciel
  • ZEN (blue) de Zeiss avec le module Tiles permettant la production d’une méga-image à partir de plusieurs champs

Support technique
  • Monique Vasseur, responsable de la plateforme de microscopie photonique
  • Nicolas Stifani, Coordonnateur Microscopie avancée


Dernière mise à jour : 12 octobre 2018