Microscope Nikon Eclipse TE2000U

TE2000U

Local : G-312
Support technique : Monique Vasseur et Nicolas Stifani
Mode d’emploi

  • Microscope à épifluorescence plein champs, inversé
  • Fond clair, DIC, contraste de phase et polarisation
  • Imagerie 4D (XYZT)
  • Caméra CCD 14 bit
  • Mise au point automatique par algorithme
  • Moteur Z, platine manuelle
  • Température (20-50°C) via une platine chauffante
  • Micromanipulation et femto-injection possibles
Applications
  • Microscopie de cellules de mammifères, levures et bactéries
  • Épifluorescence à champ large (lampe au mercure)
  • Fond clair, DIC, contraste de phase et polarisation
  • Imagerie multidimensionnelle (automatique : Z, durée)
  • Imagerie avec température possible seulement avec les objectifs à longue distance de travail (4x, 20x et 40x ELWD)

Objectifs
  • 4x/0,10 Plan
  • 20x/0,40 Ph1 ADL LWD, couvre-objet 1,2 mm; WD 3,0
  • 40x/0,60 Plan Fluor, Ph2, DIC M, ELWD avec une bague correctrice 0,0-2,0 mm; WD 2,7-3,7
  • 40x/0,75 Plan Fluor; Ph2 DLL, 0,17 mm; WD 0,72
  • 60x/1,40 Plan Apo, DIC H; 0,17 mm; WD 0,21 immersion à l’huile
  • 100x/1,40 Plan Apo, DIC H; 0,17 mm; WD 0,13; immersion à l’huile

Tableau des objectifs


Sources lumineuses
  • Lampe au mercure (HBO 103W/2 d’Osram) pour l’épifluorescence
  • Lampe halogène pour la lumière transmise

Détecteurs
  • Caméra CCD 14 bit, CoolSnap HQ2 de Photometrics : 1392×1040 pixels de 6,45 µm chacun, 11 fps
    • Refroidie à -30oC, bruit d’intégration (Readout noise) de 4,5 e- @ 10 MHz  et 5,5 e- @ 20 MHz
  • Possibilité d’ajouter une caméra sur la sortie frontale

    Filtres
    • Cubes de filtres (à changement manuel (non motorisé), tourelle à 6 positions) :
      • DAPI (Chroma 31000): BP D350/50x BS LP400 BP D460/50m
      • CFP (Chroma 31044v2): BP D436/20x BS DCLP455 BP D480/40m
      • GFP (Chroma 41001): BP D480/30x BS DCLP505 BP D535/40m
      • YFP (Chroma 41028): BP HQ500/20x BS QLP515 BP HQ535/30m
      • Cy3 (Chroma 41007): BP HQ535/50x BS QLP565 BP HQ610/75m
      • mCherry (Chroma 49008 ET): BP ET560/40x BS TLPxr585 BP ET630/75m
      • Texas red (Chroma 41004): BP HQ560/55x BS QLP595 BP HQ645/75m
      • Cy5 (Chroma 31023): BP D640/20x BS DCLP660 BP D680/30m
      • Cy5.5 (Chroma 41022): BP HQ665/45x BS QLP695 BP HQ725/50m

    Platine et moteur Z
    • Déplacements en XY : platine manuelle
    • Déplacements en Z : Moteur Z (Prior)

    Incubation, perfusion, micromanipulation et injection
      • L’incubation entre 20-50°C est possible en utilisant la chambre de perfusion FCS2 de Bioptechs (chambre formée entre 2 lamelles de 40 mm diam.). Le chauffe-objectif est nécessaire si la chambre FCS2 est utilisée avec un objectif à immersion.
    • L’autre alternative est l’utilisation de la Thermo Plate qui agit comme une platine transparente et chauffante (20-50°C).
    • La micromanipulation à une pipette est possible en installant l’Injectman 5179 de Brinkmann/Eppendorf
    • La femto-injection est possible en installant le Femtojet 5247 de Brinkmann/Eppendorf

    Contenants et porte-échantillon compatibles avec la platine (ouverture ronde)
    • Pétri et flacons de culture de toutes grandeurs
    • Lame histologique
    • Plaque multi-puits
    • Chambre de perfusion FCS2 de Bioptechs

    Logiciel
    • Metamorph de Molecular Devices

    Accessoires
    • Micro-manipulateur : Injectman 5179 de Brinkmann (Eppendorf)
    • Femtoinjecteur : Femtojet 5247 de Brinkmann (Eppendorf)
    • Thermo Plate MATS-U505R30 de Tokai Hit
      • Platine chauffante et transparente compatible avec microscopie : ambiante à 50°C +/-0,3°C
      • Épaisseur de la plaque de verre : 0,5 mm au centre (50 mm x 50 mm), 1,0 mm ailleurs
      • Compatible avec le contraste de phase, le DIC et la polarisation
    • Chambre environnementale FCS2 de Bioptechs (FCS2 : Focht Live-Cell Chamber System)
      • Chambre de perfusion fermée compatible avec le DIC, la fluorescence et les objectifs à immersion
      • Micro-perfusion par un système de Microaqueduct: 0,2 – 180 ml/h
      • Échange complet du milieu possible par la pompe péristaltique en 1 sec. (max.)
      • Contrôle de la température de la chambre : ambiante – 50°C +/-0,1°C
      • Volume de la chambre : 6,6 – 706 µl selon l’épaisseur du joint de montage (50 – 1000 µm)
      • Champ visuel : 22 mm de diamètre
      • Nécessite culture sur lamelle de 40 mm de diamètre et 0,17 mm d’épaisseur
      • Chauffe-objectif compatible avec les objectifs de 26 à 35 mm de diamètre (100x à immersion)
      • Incubateur Boekel: mini-étuve portative pour garder le milieu de perfusion à la bonne température

    Support technique
    • Monique Vasseur, responsable de la plateforme de microscopie photonique
    • Nicolas Stifani, Coordonnateur Microscopie avancée

    Dernière mise à jour : 14 janvier 2020