Microscope confocal Leica SP5-TCS avec FCS

Local : 3223-2, pavillon J.-Armand-Bombardier
Support technique : Emmanuel Bajon
Feuille de route

  • Microscope confocal (Point Scanner), inversé IX71-FV
  • Lasers avec AOTF (intensité réglable pour chaque ROI)
  • FRAP multi-régions et de forme libre définissable
  • FRET CFP/YFP, DIC
  • 2 PMT pour la fluorescence, 1 PMT en transmise, 12 bit
  • Images jusqu’à 2048×2048 pixels
  • Imagerie 5D (XYZTC) pour 2 couleurs (for 2 channels)
  • Changement des filtres et dichroïques manuellement
  • Moteur Z, mais platine (XY) manuelle
Applications
  • Microscopie confocale point par point
  • Différentes possibilités de scan: zoom, rotation du champ, ligne (droite ou libre), un point en Z ou dans le temps
  • Imagerie multidimensionnelle 5D pour 2 couleurs en simultané ou en séquentiel (manuel dès que plus de 2 couleurs)
  • FRET, FRAP multi-région et de forme définissable, avec possibilité de varier l’intensité d’excitation d’une ROI à l’autre
  • Fond clair et DIC
Objectifs
  • 10x/0.30 Plan Fluotar
  • 20x/0.50, Plan Apo, DIC, couvre-objet de 0,17 mm
  • 40x/1.25, HCX Plan Apo, immersion à l’huile
  • 63x/1.20, HCX Plan Apo, immersion à l’eau
  • 63x/1.47, HCX Plan Apo, immersion à l’huile

Sources lumineuses
  • Lasers pour la microscopie confocale et les images en lumière transmise :
    • 458, 476, 488,, 496, 514 nm – 100 mW (laser Argon multi-lignes)
    • 561 nm – 10 mW (DPSS)
    • 594, 633 nm  – 10 mW (laser Helium-Neon)
      NB: il est impossible de voir du DAPI sur ce microscope (pas de laser UV)
  • Lampe au mercure pour l’épifluorescence aux oculaires uniquement
  • Lampe halogène avec fibre optique pour la lumière transmise aux oculaires uniquement

Détecteurs
  • Tubes photomultiplicateurs (PMTs) 8 bit: 18×18 à 4096×4096 pixels, approx. 4 fps à 512×512
    • 2 PMT pour la fluorescence
    • 1 PMT pour la lumière transmise
    • Vitesse d’intégration réglable (Fast to Slow Scan speeds)
  • Photodiodes à avalanche (APD)

Filtres
  • Cubes de filtres pour observation aux oculaires (avec la lampe au mercure) Tourelle à 6 positions :
    • 1: vide, pour observer en fond clair et imager en microscopie confocale
    • 2: Analyseur pour observer en DIC aux oculaires
    • 3 : FITC
    • 4: TRITC

Précision de la platine et du moteur Z
  • Platine XY manuelle
  • Moteur Z

Contenants et porte-échantillon compatibles avec la platine (encart rond)
  • Lame histologique
  • Pétri de 35 mm de diamètre avec fond en lamelle de verre de 0,17 mm
  • Chambre FCS2 de Bioptechs

Logiciel
  • LAF de Leica (version originale)

    Support technique
    • Emmanuel Bajon, responsable de la plateforme de microscopie photonique


    Dernière mise à jour : 10 juillet 2024