Microscope Nikon Eclipse TE2000E

NikonTE2000E

Local : D-509
Support technique : Monique Vasseur
Mode d’emploi

  • Microscope à épifluorescence, inversé à champ large
  • Fond clair et contraste de phase
  • Moteur Z et platine motorisée
  • Roues de filtres (excitation et émission)
  • Mise au point automatique (PFS et algorithme de NIS)
  • Incubateur (32-42°C) opaque à la lumière
  • Chambre LiveCell avec CO2
  • Micromanipulation et femto-injection possibles
  • Imagerie 6D (XYZTC et multipoint)
  • Caméras CCD, 14 et 16 bit
Applications
  • Microscopie de cellules vivantes (Live cell) avec température et CO2 à haute résolution (10x à 100x)
  • Imagerie multidimensionnelle 6D de longue durée
  • Épifluorescence à champ large (lampe métal-halide)
  • Luminescence (capture directe sous le microscope), BRET
  • Fond clair et contraste de phase (pas de DIC)

Objectifs
  • 10x/0,30 Plan Fluor, Ph1 DL; 1,20 mm; WD 15,20 mm
  • 20x/0,45 Plan Fluor, Ph1 ADL ELWD avec bague correctrice 2-2,0 mm; WD 7,40 mm
  • 40x/0,60 Plan Fluor, Ph2 ADL ELWD avec une bague correctrice 0-2,0 mm; WD 3,7-2,7 mm
  • 40x/0,90 S Fluor; DIC M/N2 avec une bague correctrice 0,11-0,23 mm; WD 0,30 mm
  • 40x/0,95 Plan Apo; DIC M/N2 avec une bague correctrice 0,11-0,23 mm; WD 0,14 mm
  • 60x/0,70 Plan Fluor, DIC M/N2 ELWD avec bague correctrice 050-1,50 mm; WD 2,1-1,5 mm
  • 60x/1,40 Plan Apo, VC DIC N2, 0,17 mm; WD 0,13 mm; immersion à l’huile
  • 100x/1,45 Plan Apo lambda OFN25 DIC N2; 0,17 mm; WD 0,13 mm; immersion à l’huile

Tableau des objectifs

Sources lumineuses
  • Lampe X-Cite exacte d’Excelitas (lampe métal-halide de 200 W) pour l’épifluorescence entre 340-675 nm
    • Filtre ne laissant passer que les longueurs d’onde entre 340 et 675 nm (non-idéal pour Cy 5.5)
    • Délai d’allumage de 4 minutes; réchauffement optimal pour quantification : 30 min.
    • Obturateur interne 5-6 ms
    • Réglage de l’intensité de la lampe par incréments de 1%
    • Possibilité d’étalonner l’intensité de la lampe : de puissance relative (en %) à absolue (en watts)
    • Stabilité de l’intensité sur courte (ms) et longue durée (s – h) : +/-0,5%
  • Lampe halogène pour la lumière transmise

Détecteurs
  • Caméra CCD 14 bit, CoolSnap HQ2 de Photometrics : 1392×1040 pixels de 6,45 µm chacun, 11 fps
    • Refroidie à -30°C, bruit d’intégration (Readout noise) de 4,5 e- @ 10 MHz et 5,5 e- @ 20 MHz

Sur demande (non installées) :

  • Possibilité d’ajouter une caméra sur la sortie frontale et une autre sur la sortie sous le microscope
  • Caméra CCD 16 bit, faible bruit, Pixis 1024B de Princeton : 1024×1024 pixels de 13 µm chacun; 0,1 fps
    • Temps d’exposition minimum : 600 ms
    • Temps d’intégration minimum : 10 secondes ( ~ délai avant de voir une image à l’écran)
    • Refroidie à -70°C, bruit d’intégration (Readout noise) de 3,6 e- @ 0,10 MHz et 9 e- @ 2 MHz

Filtres
  • Cubes de filtres (tourelle motorisée à 6 positions) :
    • DAPI (Chroma 31000v2): BP AT350/50x BS DCLP400 BP D460/50m
    • CFP (Chroma 49001 ET): BP ET436/20x BS TLP455 BP ET480/40m
    • GFP (Chroma 41001 HQ): BP HQ480/40x BS QLP505 BP HQ535/50m
    • YFP (Chroma 49003 ET): BP ET500/20x BS TLP515 BP ET535/30m
    • Cy3.0 (Chroma SP102v1): BP HQ546/11x BS QLP557 BP HQ567/15m
    • Cy3.5 (Chroma SP103v2): BP HQ581/10x BS QLP593 BP HQ617/40m
    • mCherry (Chroma 49008 ET): BP ET560/40x BS TLPxr585 BP ET630/75m
    • Cy5.0 (Chroma 49006 ET): BP ET620/60x BS TLPxr660 BP ET700/75m
    • Cy5.5 (Chroma 41022): BP HQ665/45x BS QLP695 BP HQ725/50m
  • Cubes de miroirs polychroïques (à utiliser avec les roues de filtres):
    • DAPI/FITC/TRITC : Réflexion : SP 410 + BP 433/10 + BP 484/32 + BP 557/30
      Transmission : BP 419/18 + BP 453/30 + BP 521/42 + BP 611/78
    • CFP/YFP/CY5: : Réflexion : BP 433/33 + BP 506/32 + BP 620/53
      Transmission : BP 469/42 + BP 558/72 + LP 647
    • CFP/YFP/mCherry: : Réflexion : SP 453 + BP 500/33 + BP 576/37 + LP 668
      Transmission : BP 469/31 + BP 538/41 + BP 633/73
  • Roue de filtres à l’excitation (8 positions de 32 mm) :
    • DAPI (Chroma 86013v2) : BP D350/50
    • CFP (Chroma 86008v2) : BP S430/25
    • FITC (Chroma 86013v2): BP S484/15
    • YFP (Semrock FF01-500/24-32): BP 500/24
    • TRITC (Chroma 86013v2): BP S555/25
    • mCherry (Chroma ET 236404): BP ET572/35
    • CY5 (Chroma 86008v2): BP S622/36
  • Roue de filtres à l’émission (10 positions de 25 mm) :
    • DAPI (Chroma 86013v2) : BP S457/17
    • CFP (Chroma 86008v2) : BP S465/30
    • FITC (Chroma 86013v2): BP S517/30
    • YFP (Chroma 86008v2): BPS550/50
    • YFP (Semrock FF01-550/49-25) : BP 550/49
    • TRITC (Chroma 86013v2): BP S605/40
    • mCherry (Semrock FF01-641/75-25): BP 641/75
    • CY5 (Chroma 86008v2): BP S700/75

NB :
Le système de mise au point automatique PFS de Nikon utilise un LED de 780 +/- 5 nm et un filtre amovible 750 LP.
Cet autofocus coupe les longueurs d’onde > 750 nm et donc ne peut pas être utilisé avec le Cy5.5


Platine et moteur Z
  • Déplacements en XY : platine motorisée
  • Déplacements en Z : Moteur Z
  • Perfect Focus avec LED de 780 nm et avec filtre dans le trajet lumineux LP 750 nm (inadéquat pour le Cy5.5)

NB : En lumière transmise, pour que le PFS fonctionne, il faut insérer 2 filtres IR dans le trajet lumineux: celui du PFS et celui du statif près de la lampe halogène.


Incubation
  • Cabinet-incubateur noir opaque, englobant tout le microscope – pour la luminescence
    • Contrôleur de température Solent Scientific de 32,0°C à 42,0°C
  • Mini-chambre environnementale pour un Pétri de 35 mm seulement
    • Contrôleur de CO2 Solent Scientific pour la mini-chambre
    • Compatible avec la microscopie en lumière transmise et en épifluorescence

Contenants et porte-échantillons compatibles avec la platine (différents encarts)
  • Plaque multi-puits
  • Pétri de 35 mm de diamètre
  • Lame et lamelle

Logiciel
  • NIS Elements de Nikon

Accessoires
  • Micro-manipulateur avec double pipette de Nikon
  • Femtoinjecteur Hamilton ML560

Support technique
  • Monique Vasseur, responsable de la plateforme de microscopie photonique
  • Jacqueline Kowarzyk, agente de recherche dans le laboratoire du Dr. S. Michnick